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毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白含量

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【作者】 李茂光武琳琳米健秋毛琦琦李亚南杨英李健峰叶强

【Author】 LI Mao-guang;WU Lin-lin;MI Jian-qiu;MAO Qi-qi;LI Ya-nan;YANG Ying;LI Jian-feng;YE Qiang;National Institutes for Food and Drug Control,Key Laboratory of the Ministry of Health for Research on Quality and Standardization of Biotech Products;

【机构】 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室江苏省(泰州)疫苗工程技术研究中心安捷伦科技(中国)有限公司北京放射与辐射医学研究所

【摘要】 目的建立毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用胶束电动毛细管电泳法测定TT含量,使用内径50μm未涂层熔融石英毛细管柱(有效柱长为104 cm),以40 mmol/L硼酸盐-SDS缓冲液(p H 9.30)为电泳介质,电压为30 k V,在200 nm紫外波长条件下进行检测。对方法的专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、准确性、定量限进行验证,并用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量。结果该方法专属性、精密度、重复性、稳定性、准确性良好,TT在10~35μg/ml范围内与色谱峰相对内标峰面积比值呈良好的线性关系,r~2=0.995,游离蛋白的定量限为7μg/ml。用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量均小于10μg/ml。结论建立的毛细管电泳法操作简便、准确,可用于检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中的游离蛋白含量。

【基金】 国家863计划“疫苗效果和质量评价新技术研究”(2012AA02A402)
【所属期刊栏目】 技术方法 (2016年07期)
  • 【DOI】10.13200/j.cnki.cjb.001379
  • 【分类号】R392-33
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】107
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