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中度嗜盐菌Halobacillus Y5甘氨酸甜菜碱转运蛋白opuD基因的克隆及功能分析

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【作者】 王艳红曹宁贾桂燕余丽芸姜巨全

【Author】 WANG Yan-hong;CAO Ning;JIA Gui-yan;YU Li-yun;JIANG Ju-quan;College of Life Science,Northeast Agricutural University;

【机构】 东北农业大学生命科学学院黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院

【摘要】 目的克隆中度嗜盐菌Halobacillus Y5甘氨酸甜菜碱转运蛋白(betaine-choline-carnitine transporter,BCCT)opu D基因,对其结构及蛋白功能进行分析,并通过耐盐碱特性试验明确其功能。方法将经过Sau3AⅠ部分酶切回收的Halobacillus Y5基因组总DNA,与用Bam HⅠ酶切并去磷酸化的线性p UC18载体连接,电转化法导入E.coli KNabc感受态细胞中,涂布在含0.2 mol/L Na Cl、Amp50的LBK固体培养基上,筛选阳性克隆,提取质粒测序后,进行生物信息学分析及耐盐碱特性检测。结果已从中度嗜盐菌-喜盐芽孢杆菌Halobacillus Y5中成功克隆了1个新的耐盐碱基因,将其命名为HY5opu D,该基因是1个新的甘氨酸甜菜碱转运蛋白基因,其编码的蛋白氨基酸序列和结构不同于以往报道的Opu D转运蛋白,且该基因能够使KNabc在0.2 mol/L Na Cl、5 mmol/L Li Cl及碱性p H 8.0环境下生长。结论成功克隆了1个新型的opu D转运蛋白基因,为开发利用中度嗜盐菌的耐盐碱基因奠定了理论基础。

【基金】 大庆市指导性科技计划项目(szdfy-2015-41);黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(12541597)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2017年03期)
  • 【DOI】10.13200/j.cnki.cjb.001680
  • 【分类号】Q93;Q78
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】128
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