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重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺的优化

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【作者】 陈继军南建军乔玉玲张超宋兰兰熊颖安晨房世娣毛晓燕

【Author】 CHEN Ji-jun;NAN Jian-jun;QIAO Yu-ling;ZHANG Chao;SONG Lan-lan;XIONG Ying;AN Chen;FANG Shi-di;MAO Xiao-yan;The Fourth Department of Research,Lanzhou Institute of Biological Products Co.,Ltd.,Center for Gansu Provincial Vaccine Engineering Research;

【通讯作者】 毛晓燕;

【机构】 兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心

【摘要】 目的优化重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺。方法采用试验设计(Design of Experiment,DOE)方法优化重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺,试验因子为中间清洗液Na Cl浓度(130~870 mmol/L)和洗脱液p H(3.50~4.20),试验响应变量为纯化后样品收率、纯度、残余宿主蛋白含量、外源DNA含量及蛋白A含量,通过DOE构建模型,预测中间清洗液Na Cl浓度和洗脱液p H范围。同时采用DOE方法验证预测工艺参数的稳定性。结果确定中间清洗液Na Cl浓度为400~700 mmol/L,洗脱液p H为3.55~3.75。试验因子在该参数范围内变动时,样品收率均大于80%,纯度均大于97%,外源DNA浓度均低于260 pg/mg,宿主蛋白含量均低于2 300 ng/mg,蛋白A含量均低于6.5 ng/mg。结论成功优化了重组抗CD52单克隆抗体的亲和纯化工艺,且具有较好的稳定性。

【基金】 兰州市科技重大专项(2017-02-1)
【所属期刊栏目】 技术方法 (2019年04期)
  • 【DOI】10.13200/j.cnki.cjb.002567
  • 【分类号】R392-33
  • 【下载频次】276
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