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PepT1基因绝对荧光定量PCR标准曲线的建立

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【作者】 李慧锋李丽张丽娟徐玉良李武峰

【Author】 LI Hui-feng,LI Li,ZHANG Li-juan,XU Yu-liang,LI Wu-feng(College of Life Sciences,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi 030801,China)

【机构】 山西农业大学生命科学学院

【摘要】 为研究PepT1 mRNA在鸡小肠的表达对于蛋白质消化吸收的影响,实验建立了PepT1基因绝对荧光定量PCR标准曲线。根据GenBank中PepT1的序列信息设计合成两对引物,引物一是克隆引物,用于从鸡小肠细胞中扩增出cDNA片段;引物二是荧光定量PCR引物,其长度包含于引物一中,用荧光定量PCR来检测基因的表达。通过克隆出PepT1基因282 bp部分片段并插入到PMD18载体中,从而构建出绝对荧光定量PCR标准曲线。从实验结果得出标准曲线的回归方程为Y=-3.205X+34.170,其回归系数R2=0.990,溶解曲线表现为单一的峰,通过对结果的具体分析,认为该方法可靠,特异性均较强,可成功构建目的基因的标准曲线。

【关键词】 鸡小肠PepT1荧光定量PCR标准曲线
【基金】 863项目(2008AA101009);中国博士后科学基金(20090451360);山西省回国留学人员科研资助项目(2009035);山西农业大学科技创新基金(200902)
  • 【DOI】10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2010.04.020
  • 【分类号】R440
  • 【被引频次】46
  • 【下载频次】1525
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