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副溶血性弧菌CalR调控vopB2的分子机制

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【作者】 张凌宇唐浩仇越张义全王丽

【Author】 ZHANG Ling-Yu;TANG Hao;QIU Yue;ZHANG Yi-Quan;WANG Li;Nanjing University Hospital;School of Medicine, Jiangsu University;The First Hospital Affiliated to Henan University;

【通讯作者】 王丽;

【机构】 南京大学医院江苏大学医学院河南大学第一附属医院

【摘要】 【背景】副溶血性弧菌是一种非常重要的食源性致病菌,CalR蛋白是一种全局转录调节因子。III型分泌系统2 (Type 3 secretion systems 2 T3SS2)是副溶血性弧菌主要的毒力因子,vopB2是T3SS2中的一个关键效应蛋白。【目的】研究副溶血弧菌CalR对vopB2的转录调控机制。【方法】利用引物延伸实验鉴定vopB2及vtrA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断CalR对靶基因的调控关系;采用实时定量RT-PCR研究靶基因mRNA在WT和ΔcalR中转录丰度,验证CalR对靶基因的转录调控关系,进一步利用LacZ实验通过比较β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对靶基因的调控关系;利用凝胶阻滞实验分析His-CalR对靶基因启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】vopB2有两个转录起始位点A(-130和-28)且其活性受CalR的直接抑制;引物延伸和LacZ结果表明CalR对vtrA的转录并无调控作用。【结论】CalR直接抑制vopB2的转录,该抑制作用与vtrA无关联。

【关键词】 副溶血弧菌转录调控CalRvopB2vtrA
【基金】 国家自然科学基金青年项目(81501779);河南省高等学校重点科研项目(18A320024);江苏省自然科学基金青年基金(BK20160505)~~
【所属期刊栏目】 研究报告_医学微生物学 (2019年07期)
  • 【DOI】10.13344/j.microbiol.china.190068
  • 【分类号】R378
  • 【下载频次】48
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