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USP39抑制肿瘤细胞放射敏感性的机制

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【作者】 蔡梦娇雷雨田田孙潇董怡萍刘霞李俊俊朱青韩苏夏

【Author】 CAI Meng-jiao;LEI Yu-tiantian;SUN Xiao;DONG Yi-ping;LIU Xia;LI Jun-jun;ZHU Qing;HAN Su-xia;Department of Oncology Radiotherapy, The First Affiliated Hospital of Xi’an Jiaotong University;Department of Abdominal Oncology,West China Hospital of Sichuan University;

【通讯作者】 韩苏夏;

【机构】 西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科四川大学华西医院腹部肿瘤科

【摘要】 目的探讨泛素特异性肽酶39(ubiquitin-specific peptidase 39, USP39)对肿瘤细胞DNA损伤应答通路的生物学作用。方法将不同肿瘤细胞系(293T, HeLa, U2OS, T47D)分别在含有100 mL/L FBS的DMEM或RPMI-1640培养基中,在37℃含有50 mL/L CO2的培养箱中培养;用MTS[3-(4,5-diethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-etrazolium, inner salt]方法检测敲低USP39对肿瘤细胞放射敏感性的影响;流式细胞术检测同源重组(homologous recombination, HR)和非同源末端连接(non-homologous end joining, NHEJ)修复效率;Western blot检测敲低USP39对DNA损伤应答相关分子的表达情况;用免疫共沉淀、蛋白纯化及质谱技术,检测与USP39相互作用的蛋白并且进行基因本体论(gene ontology, GO)分析;通过微辐射诱导DNA损伤并利用激光共聚焦显微镜检测其募集至DNA损伤位点的情况。结果敲低USP39导致肿瘤细胞的放射敏感性显著增加(P<0.05);敲低USP39显著抑制肿瘤细胞的HR与NHEJ修复效率(P<0.05);敲低USP39能够促进DNA损伤应答因子蛋白的表达;USP39能够聚集至DNA损伤位点;USP39相互作用蛋白与多个DNA损伤应答相关的信号通路有关。结论 USP39对DNA损伤应答过程具有重要作用。

【关键词】 恶性肿瘤USP39DNA损伤应答放射敏感性
【基金】 陕西省创新人才推进计划-重点科技创新团队项目(No.2018TD-002);国家自然科学基金面上项目(No.81272488,81472795,81874223)~~
【所属期刊栏目】 肿瘤放疗敏感性专题 (2020年01期)
  • 【分类号】R730.55
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