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人腺病毒36型在3T3-L1脂肪细胞棕色化过程中的作用

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【作者】 刘杰努尔比耶·努尔麦麦提徐尤宗胜高佳乐胡婷婷关亚群

【Author】 LIU Jie;Nuermaimaiti Nuerbiye;XU Youzongsheng;GAO Jiale;HU Tingting;GUAN Yaqun;Department of Biochemistry and Molecular Biology, School of Basic Medical Sciences,Xinjiang Medical University;

【通讯作者】 关亚群;

【机构】 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

【摘要】 目的探讨人腺病毒36型(Ad36)在诱导3T3-L1脂肪细胞棕色化过程中的作用。方法 (1)采用经典的鸡尾酒诱导法(MDI)将3T3-L1前脂肪细胞定向成脂诱导分化至第4天,然后将已经分化的3T3-L1脂肪细胞分为MDI组、MDI+Rapa组、MDI+Ad36组以及MDI+Rapa+Ad36组,并将继续分化至第8天的细胞行氟化硼二吡咯染色,观察细胞内脂滴大小与成脂情况;(2)实时荧光定量PCR检测4组细胞中棕色脂肪标记基因过氧化物酶体增殖物活化受体共激活因子1α(pgc1α)、解偶联蛋白1(ucp1)、成纤维生长因子21(fgf21),线粒体相关酶基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA表达水平;(3)Western blot分别检测上述基因蛋白质表达水平。结果 (1)在3T3-L1脂肪细胞分化的第8天,MDI与MDI+Rapa组细胞内均出现较多且大的脂滴;与MDI组相比,MDI+Ad36组脂滴减小;与MDI+Ad36组相比,MDI+Ad36+Rapa组脂滴略有增大。(2)与MDI组相比,MDI+Ad36组棕色脂肪标记基因pgc1α、ucp1、fgf21,线粒体相关酶基因atp5o、cox5b、nd2基因mRNA表达水平显著升高,在加入Rapa后,上述基因mRNA表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)与MDI组相比,MDI+Ad36组PGC1α、UCP1、FGF21、ATP5O、COX5B、ND2以及磷酸化mTOR蛋白质表达水平均显著升高(P<0.05),在加入Rapa后,上述蛋白质表达水平均显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 Ad36可能通过mTOR上调pgc1α的表达,并进一步使ucp1、fgf21、atp5o、cox5b、nd2的基因表达水平升高,加快甘油三酯的分解与线粒体氧化磷酸化,使3T3-L1脂肪细胞棕色化。

【基金】 国家自然科学基金面上项目(81873664)
【所属期刊栏目】 专题研究——肥胖及其相关代谢性疾病的发病机制研究 (2019年09期)
  • 【分类号】R589.2
  • 【下载频次】134
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