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鹿骨类药材DNA提取方法研究

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【作者】 赵静雪陈敏崔光红唐仕欢黄璐琦何利群夏瑞雪

【Author】 ZHAO Jingxue1,CHEN Min2,CUI Guanghong2,TANG Shihuan2,HUANG Luqi2,HE Liqun3,XIA Ruixue3(1.College of Traditional Chinese Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069,China;2.Institute of Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medicinal Sciences,Beijing 100700,China;3.Harbin Gloria Pharmaceuticals Co.,Ltd.,Harbin 150025,China)

【机构】 首都医科大学中医药学院中国中医科学院中药研究所哈尔滨誉衡药业股份有限公司

【摘要】 目的:建立一种简便、实用、高效的鹿骨DNA提取方法,为动物骨类药材真伪鉴别奠定基础。方法:取净制后的梅花鹿骨、马鹿骨、牛骨、狗骨、猪骨样品,经干燥、研磨粉碎后,对脱钙时间(24,48,72 h),脱钙温度(4,25,37,56,70℃)及不同提取方法(改良SDS提取法、试剂盒提取法)进行考察,分析比较不同提取方法获得的DNA质量。结果:实验证明,脱钙过程有助于骨细胞的裂解,在较宽泛的脱钙时间及脱钙温度下,均可从骨细胞中获得DNA,但提取量稍有差异。结论:骨粉经0.5 mol.L-1EDTA脱钙液4℃脱钙24 h,加入裂解液后56℃水浴1 h,即可从鹿骨(约0.1 g)中提取到高质量DNA,用于PCR扩增。

【关键词】 鹿骨脱钙DNA提取方法优化
【基金】 中国中医科学院自主选题项目(Z02085)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2011年03期)
  • 【分类号】S865.42
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】420
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