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IgG-HepG2细胞评价复方苦参注射液及其生产过程可能产生致敏原的研究——利用生物技术进行过程监控致敏性的方法学探索

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【作者】 袁梽漪王玉刚雷帆卢希赵爽姜敬非李慧玉陈勃杭王智民邢东明丁怡杜力军

【Author】 YUAN Zhiyi1,WANG Yugang1,LEI Fan1,LU Xi1,ZHAO Shuang1,JIANG Jingfei1,LI Huiyu1,CHEN Bohang1,WANG Zhimin2,XING Dongming1,DING Yi1,DU Lijun1(1.Protein Science Laboratory of Ministry of Education,Laboratory of Pharmaceutical Sciences,School of Life Sciences and School of Medicine,Tsinghua University,Beijing 100084,China;2.Institute of Chinese Materia Medica,Chinese Academy of China Medical Sciences,Beijing 100700,China)

【机构】 清华大学医学院生命科学学院教育部蛋白质重点实验室中国中医科学院中药研究所

【摘要】 目的:利用IgG promoter-HepG2细胞对复方苦参注射液生产过程中可能产生致敏原的生产节点进行研究。方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达质粒,转染入HepG2细胞,与常见致敏性物质(葛根素,卵白蛋白,LPS和伤寒菌疫苗)、复方苦参注射剂中使用到的辅料(NaOH,醋酸,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯即吐温80和乙醇)和生产过程中关键节点样品(S1~S8)进行孵育,30 m in后拍照,图像分析软件统计细胞荧光强度变化。结果:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏性物质呈阳性反应。注射剂辅料中醋酸和吐温80有致敏性,生产过程8个样品中,2个样品有显著致敏性。结论:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏原反应敏感,特异性高,适用于中药注射剂中致敏原快速筛选,可实现对中药注射剂生产过程中致敏原的实时监控。

【关键词】 IgG中药注射剂苦参过敏反应
【基金】 国家自然科学基金项目(30801523,30973896,81073092);国家“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09308-003,2009ZX09502-021,2009ZX09502)
【所属期刊栏目】 专栏 (2011年14期)
  • 【分类号】R286
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】195
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