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基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法研究

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【作者】 蒋超张雅华陈敏袁媛林淑芳吴志刚

【Author】 JIANG Chao,ZHANG Ya-hua,CHEN Min,YUAN Yuan*,LIN Shu-fang,WU Zhi-gang(Institute of Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100700,China)

【机构】 中国中医科学院中药研究所

【摘要】 目的:筛选获得金银花真伪鉴别SNP位点并建立双向位点特异性PCR方法,用于鉴别金银花和其常见伪品以及两者的混杂品。方法:通过对GenBank收录的忍冬属植物叶绿体trnL-trnF序列进行对比分析,获得金银花真伪鉴别SNP位点;并依据该SNP位点设计特异性引物,对84份金银花基原植物及其市售饮片、伪品进行双向位点特异性PCR扩增,并根据真伪品的特异性条带进行金银花药材鉴别。结果:退火温度为61℃时,正品均出现468 bp的条带,红腺忍冬、华南忍冬、灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬、水忍冬、金银忍冬、郁香忍冬、新疆忍冬、繁果忍冬等9个伪品均出现324 bp的条带,在正品DNA中掺入5%以上伪品时同时出现正品和伪品条带。结论:双向位点特异性PCR可以鉴别金银花真伪品及两者的混杂样品。

【基金】 国家自然科学基金项目(81001605);中药制药过程新技术国家重点实验室开放基金项目(SKL2010M0101)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2012年24期)
  • 【分类号】S567.79
  • 【被引频次】29
  • 【下载频次】587
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