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快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用

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【作者】 陈康蒋超袁媛黄璐琦李曼

【Author】 CHEN Kang;JIANG Chao;YUAN Yuan;HUANG Lu-qi;LI Man;Anhui University of Chinese Medicine;State Key Laboratory of Dao-di Herbs Breeding Base,National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences;

【机构】 安徽中医药大学中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

【摘要】 为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材(乌梢蛇,金钱白花蛇,蕲蛇)真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础,采用碱裂解法提取基因组总DNA,加入特异性PCR引物,采用两步法进行PCR扩增,从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30~45 min完成,为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。

【关键词】 快速PCR蛇类中药材分子鉴定荧光检测
【基金】 中医药行业科研专项(201407003)
【所属期刊栏目】 中药分子鉴定专题 (2014年19期)
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】28
  • 【下载频次】718
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