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太子参药材的快速分子鉴定

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【作者】 赵丹周涛江维克袁媛肖承鸿郑伟

【Author】 ZHAO Dan;ZHOU Tao;JIANG Wei-ke;YUAN Yuan;XIAO Cheng-hong;ZHENG Wei;Guiyang College of Traditional Chinese Medicine;State Key Laboratory of Dao-di Herbs,Chinese Materia Medica Resource Center,China Academy of Chinese Medicinal Sciences;

【机构】 贵阳中医学院中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

【摘要】 为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法,对太子参药材及其混伪品的r DNA-ITS片段进行比对分析,找出特异性片段,设计太子参鉴别引物,并优选扩增条件,扩增产物经100×SYBR Green I染色后紫外光下观察。结果显示,PCR扩增反应液(包括DNA Taq聚合酶预混液5.5μL,Tzs-2F,Tzs-2R各10 pmol,DNA模板20~80 ng,双重灭菌蒸馏水加至25μL)经95℃预变性1 min,95℃变性5 s,56℃退火延伸15 s,30个循环,72℃后延伸30 s后,在扩增产物中加入1μL100×SYBR Green I混匀后于紫外光下呈绿色荧光的为太子参,混伪品无绿色荧光出现。40 min内即可完成DNA提取、扩增等整个鉴定过程。该方法能特异性扩增太子参DNA,紫外光下肉眼观察即可鉴定药材的真伪,且操作简捷、结果准确、利于推广,可为快速鉴定中药材的真伪提供参考。

【关键词】 太子参分子鉴定特异性PCRSYBR Green I
【基金】 中医药行业科研专项(201407003);贵州省中药现代化科技产业研究开发专项(黔科合ZY字[2013]3001号);贵州省教育厅普通高等学校特色重点实验室建设(黔教合KY字[2013]108号)
【所属期刊栏目】 中药分子鉴定专题 (2014年19期)
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】12
  • 【下载频次】386
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