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基于熔解曲线分析技术的鹿茸药材分子鉴别

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【作者】 陈康蒋超袁媛黄璐琦金艳

【Author】 CHEN Kang;JIANG Chao;YUAN Yuan;HUANG Lu-qi;JIN Yan;State Key Laboratory of Dao-di Herbs,National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences;Anhui University of Chinese Medicine;

【机构】 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地安徽中医药大学

【摘要】 高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景。文章将高分辨率熔解曲线技术应用于鹿茸真伪鉴别,利用COⅠ序列,在退火温度为60℃,45个循环数的条件下,建立正品鹿茸药材熔解曲线模型,并筛选确定其DNA模板浓度、引物浓度、Mg2+浓度的适宜范围。结果表明,鹿茸药材在模板DNA质量浓度为10~100 mg·L-1、引物浓度0.2μmol·L-1,Mg2+浓度2.0 mmol·L-1的条件下,梅花鹿熔解曲线为双峰,其Tm分别为(81.96±0.07),(84.51±0.03)℃;马鹿熔解曲线为双峰,其Tm为(82.58±0.13),(85.95±0.05)℃。该方法可以实现简单、快速、高通量、可视化的鹿茸药材真伪鉴定。

【基金】 国家杰出青年科学基金项目(81325023);中医药行业专项(2014007003)
【所属期刊栏目】 资源与鉴定 (2015年04期)
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】23
  • 【下载频次】396
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