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基于熔解曲线分析技术的木通类药材的分子鉴别

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【作者】 胡峻詹志来袁媛黄璐琦刘勇

【Author】 HU Jun;ZHAN Zhi-lai;YUAN Yuan;HUANG Lu-qi;LIU Yong;School of Chinese Materia Medica,Beijing University of Chinese Medicine;State Key Laboratory of Dao-di Herbs,National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences;

【机构】 北京中医药大学中药学院中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

【摘要】 高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景。该文将高分辨率熔解曲线技术应用于木通药材的鉴别,即选择trn H-psb A通用引物,在退火温度为58℃,35个循环数的条件下,建立正品木通药材的熔解曲线模型,并筛选确定其DNA模板浓度、引物浓度、Mg离子浓度的适宜范围。结果表明,在DNA质量浓度为5~125 mg·L-1、引物浓度0.4μmol·L-1、Mg离子浓度2.0 mmol·L-1的条件下,木通药材的熔解曲线为双峰,其Tm为(81.84±0.16),(85.28±0.16)℃;川木通熔解曲线为单峰,其Tm为(83.22±0.19)℃;关木通熔解曲线为双峰,其Tm为(81.67±0.14),(84.24±0.10)℃。该方法可以实现简单、快速、高通量、可视化的的木通类药材的鉴定。

【关键词】 高分辨率熔解曲线木通分子鉴定
【基金】 中医药行业科研专项(201407003)
【所属期刊栏目】 资源与鉴定 (2015年12期)
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】254
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