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雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS克隆与表达分析

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【作者】 屠李婵张逸风苏平胡添源童宇茹关红雨赵瑜君张夏楠袁媛高伟黄璐琦

【Author】 TU Li-chan;ZHANG Yi-feng;SU Ping;HU Tian-yuan;TONG Yu-ru;GUAN Hong-yu;ZHAO Yu-jun;ZHANG Xia-nan;YUAN Yuan;GAO Wei;HUANG Lu-qi;School of Traditional Chinese Medicine,Capital Medical University;State Key Laboratory of Dao-di Herbs,National Resource Center for Chinese Materia Medica,Chinese Academy of Chinese Medical Sciences;

【机构】 首都医科大学中医药学院中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

【摘要】 根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术克隆雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS1,TwGPPS2全长cDNA,并进行生物信息学分析和蛋白表达研究。首次克隆得到TwGPPS1核苷酸的完整开放阅读框长度为1 278 bp,编码425个氨基酸蛋白,预测蛋白等电点为6.68,相对分子质量为47.189 kDa;TwGPPS2核苷酸的完整开放阅读框长度为1 269 bp,编码422个氨基酸蛋白,预测蛋白等电点为6.71,相对分子质量为46.774 kDa;进一步构建了原核重组表达载体pET-32a-TwGPPS1,pET-32a-TwGPPS2,并成功诱导出TwGPPS1,TwGPPS2重组蛋白,为深入研究此关键酶基因功能和雷公藤萜类生物合成途径奠定基础。

【基金】 北京高等学校高水平人才交叉培养“实培计划”项目;国家自然科学基金优秀青年科学基金项目(81422053)
【所属期刊栏目】 分子生药学 (2017年02期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20161222.042
  • 【分类号】S567.19
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】216
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