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双阻滞位点特异性PCR鉴别铁皮石斛及其近缘物种

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【作者】 董晓曼蒋超袁媛查良平彭代银赵玉洋

【Author】 DONG Xiao-man;JIANG Chao;YUAN Yuan;ZHA Liang-ping;PENG Dai-yin;ZHAO Yu-yang;School of Pharmacy,Anhui University of Chinese Medicine;State Key Laboratory of Dao-di Herbs Breeding Base,National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences;Key Laboratory of Modern Traditional Chinese Medicines of Anhui Province,School of Pharmacy,Anhui University of Chinese Medicine;

【机构】 安徽中医药大学药学院中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地安徽中医药大学药学院现代中药安徽省重点实验室

【摘要】 建立一种快速、准确鉴别铁皮石斛加工制品的方法。该研究通过对Gen Bank数据库收录的铁皮石斛及其同属近缘物种的ITS序列进行对比分析,根据变异位点设计双阻滞位点特异性鉴别引物,并优化PCR条件,对铁皮石斛及其69种近缘种共362个样品进行扩增和检测。结果显示,在退火温度为60℃的同一PCR反应中,铁皮石斛均扩增出397 bp条带,而其他69种近缘物种均无条带,且该方法灵敏度高,检出限可达0.03 mg·L-1。该文所建立的位点特异性PCR方法可实现铁皮石斛的准确鉴别,具有操作简便、稳定可靠、应用范围广的优点。

【关键词】 铁皮石斛位点特异性PCR分子鉴定
【基金】 中医药行业科研专项(201407003)
【所属期刊栏目】 分子生药学 (2017年05期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20170217.001
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】255
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