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快速PCR方法在哈蟆油真伪鉴别中的应用研究

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【作者】 何志一唐先明刘建辉袁媛蒋超赵玉洋王洋

【Author】 HE Zhi-yi;TANG Xian-ming;LIU Jian-hui;YUAN Yuan;JIANG Chao;ZHAO Yu-yang;WANG Yang;Harbin Food and Drug Inspection Center;State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs,National Resources Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences;

【机构】 哈尔滨市食品药品检验检测中心中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

【摘要】 该研究依据哈蟆油Cyt b基因155位SNP位点设计位点特异性PCR引物,采用碱裂解法提取基因组DNA,2步循环PCR程序进行PCR反应,并对PCR反应条件进行优化,从而建立起一种哈蟆油及其4种常见混伪品的快速PCR鉴别方法。该方法在90℃变性3 s,62℃退火延伸20 s进行32个循环时,加入2μL 100×SYBR GreenⅠ染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。该方法准确、简便,40 min内即可完成鉴别,为哈蟆油药材现场快速鉴定提供技术支持。

【关键词】 快速PCR哈蟆油分子鉴定荧光检测
【基金】 中医药行业科研专项(201407003)
【所属期刊栏目】 分子生药学 (2017年13期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20170614.012
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】173
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