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位点特异性PCR鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无药材

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【作者】 产清云蒋露程铭恩储姗姗于大庆谢晋查良平彭华胜

【Author】 CHAN Qing-yun;JIANG Lu;CHENG Ming-en;CHU Shan-shan;YU Da-qing;XIE Jin;ZHA Liang-ping;PENG Hua-sheng;School of Pharmacy,Anhui University of Chinese Medicine;School of Pharmaceutical Sciences,Anhui Medical University;Institute of Conservation and Development of Traditional Chinese Medicine Resources,Anhui Academy of Chinese Medicine;

【通讯作者】 查良平;彭华胜;

【机构】 安徽中医药大学药学院安徽医科大学药学院安徽省中医药科学院中药资源保护与开发研究所

【摘要】 建立一种鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无的DNA分子标记鉴别方法。通过测序获得延胡索、齿瓣延胡索、夏天无及其近缘种14种共56个样品的mat K,trn G和trn H-psb A序列,利用Bio Edit 7. 2. 2软件比对获得SNP位点,根据变异位点设计AS-PCR鉴别引物,并优化PCR条件,根据特异性条带分别对延胡索、齿瓣延胡索和夏天无进行鉴定。结果显示模板量(0. 6~1 200 ng)和退火温度(42~60℃)对扩增结果影响较小,循环次数对扩增结果影响较大。在循环数为20时,延胡索、齿瓣延胡索和夏天无分别扩出297 bp(mat K)、353 bp(trn G)和544 bp(mat K)的特异性条带。该研究所建立的方法对延胡索的最低检测限为6 ng,对夏天无的最低检测限为60 ng,齿瓣延胡索低于0. 6 ng。该文所建立的位点特异性PCR法能特异性鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无。

【基金】 国家自然科学基金项目(81703633,81803675)
【所属期刊栏目】 分子生药学 (2019年15期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20190527.108
  • 【分类号】R282.5
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】146
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