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高卢蜜环菌PCR-RFLP快速鉴别方法研究

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【作者】 梁宇庭蒋超周骏辉胡启跳袁媛

【Author】 LIANG Yu-ting;JIANG Chao;ZHOU Jun-hui;HU Qi-tiao;YUAN Yuan;State Key Laboratory of Dao-di Herbs Breeding Base,National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences;

【通讯作者】 袁媛;

【机构】 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

【摘要】 蜜环菌是名贵中药天麻、猪苓栽培过程中必备的共生菌,蜜环菌的菌索侵入天麻块茎或猪苓菌核后被后者消化利用,成为它们重要的营养源。不同性质的蜜环菌影响天麻、猪苓的生长。作者收集了13个地区的市售蜜环菌,经过IGS鉴定均为高卢蜜环菌。在基因水平和代谢水平上筛选出了蔗糖含量具有显著差异的2种高卢蜜环菌,命名为A型和B型,并建立了简单、准确的高卢蜜环菌DNA分子标记鉴定方法。通过比较高卢蜜环菌A型和B型蔗糖酶基因序列差异,根据差异片段设计聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态(PCR-RFLP)鉴别方法,即引物ZTM.F/ZTM.R可扩增高卢蜜环菌A型和B型,产生约304 bp长度条带,限制性内切酶EcoR V可以识别高卢蜜环菌A型和B型的差异序列,仅高卢蜜环菌B型可以被酶切形成2个片段,从而特异性鉴别高卢蜜环菌为B型。该实验建立的PCR-RFLP可以作为高卢蜜环菌A型和B型的DNA鉴别方法。在天麻和猪苓的栽培过程中,可根据品种、生长阶段、生态环境等不同需要,选择合适的菌株,因地制宜提升它们的产量和品质。

【基金】 国家科技基础性工作专项(2015FY111500);国家自然科学基金重大项目(81891013,81891010);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(ZZ10-008,ZZ11-116);中央本级重大增支减项目(2060302)
【所属期刊栏目】 道地药材及其产区特征研究专题 (2019年17期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20190701.102
  • 【分类号】R282.5
  • 【下载频次】7
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