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参芎葡萄糖注射液通过激活PI3K/AKT通路拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡

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【作者】 陆定艳李靖孙佳薛维娜何彬李勇军王永林林昌虎刘亭

【Author】 LU Ding-yan;LI Jing;SUN Jia;XUE Wei-na;HE Bin;LI Yong-jun;WANG Yong-lin;LIN Chang-hu;LIU Ting;Guizhou Provincial Key Laboratory of Pharmaceutics/State Key Laboratory of Functions and Applications of Medicinal Plants,Guizhou Medical University;School of Pharmacy,Guizhou Medical University;School of Medicine and Health Management,Guizhou Medical University;Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and Traditional Chinese Medicine (Ministry of Education) ,Guizhou Medical University;

【通讯作者】 林昌虎;刘亭;

【机构】 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学药学院贵州医科大学医药卫生管理学院贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心

【摘要】 探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin/PI法检测细胞凋亡率,基因芯片技术检测细胞表达谱的变化,荧光定量PCR技术(qRTPCR)检测PIK3CA,Bcl-2,Bax,caspase-3,GAPDH mRNA的表达,Western blot法检测PIK3CA,AKT,P-AKT,Bcl-2,Bax,caspase-3蛋白的表达水平,用试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和丙二醛(MDA)含量。结果显示,不同浓度的参芎葡萄糖注射液可显著提高H2O2诱导的H9c2细胞存活率(P<0. 01),明显逆转H2O2诱导的细胞凋亡情况(P<0. 01)。芯片实验发现,参芎葡萄糖注射液处理后,H9c2细胞有138个基因表达发生改变,其中与PI3K/AKT通路相关的PIK3CA差异表达倍数较高,为3. 59倍。qRT-PCR和Western blot结果表明,参芎葡萄糖注射液可下调H2O2处理后H9c2细胞中caspase-3的mRNA和蛋白表达水平(P<0. 01),上调PIK3CA和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平(P<0. 01),并上调AKT蛋白的磷酸化水平(P<0. 01)。在PI3K/AKT通路抑制剂LY294002作用下,参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2细胞损伤作用显著降低。结果表明,参芎葡萄糖注射液可能是通过调控PI3K/AKT信号通路来抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡。

【基金】 国家自然科学基金项目(81760699,81803827);贵州省科技计划项目(黔科合基础[2019]1280号);贵州省科学技术厅人才团队项目(黔科合平台人才[2016]5613\5677);中央引导地方科技专项项目(黔科中引地[2018]4006)
【所属期刊栏目】 药理 (2019年17期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20190619.401
  • 【分类号】R285
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