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双氢青蒿素与头孢呋辛对大肠杆菌的协同抗菌作用及机制研究

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【作者】 黄梅罗俊沈建英

【Author】 HUANG Mei;LUO Jun;SHEN Jian-ying;Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences;School of Basic Medical Sciences, Guizhou Medical University;

【通讯作者】 沈建英;

【机构】 中国中医科学院中药研究所贵州医科大学基础医学院

【摘要】 该实验用双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)与头孢呋辛(cefuroxime,CFX)或氨苄青霉素联用,探讨其对大肠杆菌的协同抗菌作用及其机制。采用微量肉汤稀释法和2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride,TTC)法确定出DHA、CFX和氨苄青霉素的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为300,25,25μmol·L-1,头孢呋辛的最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)为25μmol·L-1,DHA的MBC>600μmol·L-1;采用棋盘稀释确定出DHA与头孢呋辛或与氨苄青霉素联合的分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)分别为0.375和0.75,表现为协同作用或加和作用。从时效曲线可以得出两药联用后对大肠杆菌的作用明显强于DHA和CFX各自单用的,说明DHA联用后,可以减少CFX的使用量。继而研究了DHA与头孢呋辛协同抗菌的机制:聚丙烯凝胶电泳结果显示,两药联用的条带比各自单用的更浅,有的谱带甚至消失,说明两药联用后对总蛋白谱带具有明显的抑制作用;电导率法结果显示,两药联用后菌液的电导率值明显增高;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)检测显示,联用组碱性磷酸酶渗漏最为明显,提示菌体完整性可能受到破坏;扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)结果显示,两药联用后对大肠杆菌形态的破坏作用比单独用药组强;荧光定量PCR结果显示,两药联用能抑制大肠杆菌超氧压力反应相关基因(soxS)的表达。结果证明双氢青蒿素与头孢呋辛联用具有协同作用。

【基金】 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZZ11-046);贵州省科技厅项目(D2004-4)
【所属期刊栏目】 青蒿素研究 (2020年12期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20200225.402
  • 【分类号】R965
  • 【下载频次】194
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