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一种简便的拓宽噬菌体宿主谱方法的建立及其结果分析

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【作者】 周艳薛金鑫叶敏张辉包红朵王冉

【Author】 ZHOU Yan;XUE Jin-xin;YE Min;ZHANG Hui;BAO Hong-duo;WANG Ran;Jiangsu Key Laboratory for Food Quality and Safety-State Key Laboratory Cultivation Base, Ministry of Science and Technology,Institute of Food Safety and Nutrition, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences;School of Chemistry &Life Science, Nanjing University Jinling College;

【通讯作者】 王冉;

【机构】 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏省食品质量安全重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地南京大学金陵学院化学与生命科学学院

【摘要】 为拓宽噬菌体宿主谱,本研究通过将产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)特异性噬菌体v B_Eco M_JS09与肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7细菌进行多轮共培养,筛选到了6株能够同时裂解ETEC和EHEC O157∶H7的噬菌体,并多次传代和宿主谱鉴定,选择其中1株噬菌体Bp47-12鉴定其生物学特性。双层琼脂平板试验结果表明,噬菌体Bp47-12在平板上均呈现出了典型的裂解性噬菌体特征,空斑透亮,边缘整齐清晰,无晕环噬菌斑;宿主谱鉴定结果表明,ETEC和EHEC O157∶H7菌株均对噬菌体Bp47-12敏感,实现了噬菌体在ETEC和EHEC O157∶H7菌株之间的交叉裂解反应,拓宽了亲本噬菌体JS09的宿主谱;噬菌体Bp47-12能够耐受60℃左右高温,在p H值3~9时效价稳定;最佳感染复数为1;潜伏期为30 min,爆发期为70 min,平均爆发量分别为15;体外裂解试验结果表明,在5 h之内噬菌体Bp47-12能够有效裂解ETEC和EHEC O157∶H7菌株,OD600值下降约0.66;吸附曲线结果表明,在25 min之内,效价为105 PFU/mL的噬菌体Bp47-12能够完全吸附到宿主菌表面。本研究具有潜在的应用价值,也为拓宽裂解性噬菌体宿主谱和应用噬菌体提供了科学依据。

【基金】 国家自然科学基金(31402234)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2020年01期)
  • 【分类号】S852.6
  • 【下载频次】168
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