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caspase-3在颞叶癫痫大鼠海马神经凋亡中作用的实验研究

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【作者】 赵瑞刘建民赵文元黎莉霍克克王文仲

【Author】 ZHAO Rui~(1),LIU Jian-min~(1),ZHAO Wen-yuan~(1),Li Li~(2),Huo Ke-ke~(2),WANG Wen-zhong (1.Department of Neurosurgery,Changhai Hospital,Shanghai 200433;2.State Key Laboratory of Genetic Engineering,School of Life Sciences,Fudan University,Shanghai 200433,China)

【机构】 第二军医大学长海医院神经外科复旦大学生命科学院遗传工程国家重点实验室第二军医大学长海医院神经外科 上海200433上海200433

【摘要】 目的构建癫痫模型大鼠海马凋亡神经元的cDNA文库,采用酵母三杂交技术从中寻找caspase-3潜在的酶切底物。方法制作海人藻酸大鼠癫痫模型,取其海马组织制作酵母三杂交cDNA文库,克隆获得caspase-3的P12、P17两亚基,然后分别定向插入同一pBridge质粒,构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体并进行验证,然后对所构建文库进行筛库。结果成功构建癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了caspase-3酵母三杂交诱饵载体,并通过caspase-3与eIF2α之间的相互作用验证,经筛库获得caspase-3的底物MIZ1。结论酵母三杂交技术可用于寻找caspase-3下游底物,从癫痫模型大鼠海马的cDNA文库中筛库获得caspase-3的底物MIZ1,为进一步研究caspase-3在癫痫发作引起的海马神经元损伤中的作用奠定了基础。

【关键词】 癫痫凋亡底物caspase-3MIZ1
【基金】 国家自然科学基金资助项目(39980039);上海市自然科学基金资助项目(99ZB14039)
  • 【分类号】R742.1
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】211
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