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鱼藤酮诱导细胞内泛素化α-synuclein聚集选择性损伤多巴胺神经元

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【作者】 徐丽曹学兵孙圣刚王岚张振涛

【Author】 XU Li,CAO Xue-bing,SUN Sheng-gang,WANG Lan,ZHANG Zhen-tao(Department of Neurology,Xiehe Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Hubei Wuhan 430022,China)

【机构】 华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科 湖北武汉430030湖北武汉430030

【摘要】 目的探讨鱼藤酮对多巴胺能神经元内泛素化-αsynuclein聚集的影响及其细胞损伤作用。方法应用鱼藤酮处理经NGF诱导的神经元样分化的PC12细胞株(多巴胺能神经元)与N2a细胞株(非多巴胺能神经元)4、8、16、24 h以及用利血平预处理PC12细胞4 h再加入鱼藤酮处理16 h;采用免疫荧光双标记方法在共聚焦显微镜下观察细胞内泛素化-αsynuclein聚集,以MTT法和流式细胞术分别检测PC12细胞活力及凋亡率。结果单用鱼藤酮处理16 h后,PC12细胞株与N2a细胞株相比较,免疫荧光双标记显示PC12细胞内泛素化-αsynu-clein发生明显聚集,并且鱼藤酮对PC12细胞株的作用具有时间依赖性,而N2a细胞内泛素化-αsynuclein聚集不明显。利血平耗竭PC12细胞内多巴胺后再经鱼藤酮处理,PC12细胞内泛素化-αsynuclein聚集不明显;经不同浓度鱼藤酮处理后,细胞活力呈剂量依赖性下降;与对照组相比,经20 nmol/L鱼藤酮处理4、16、24 h后细胞存活率分别为(81.6±12.3)%、(59.8±6.7)%和(52.2±7.4)%(P<0.01)。鱼藤酮处理后出现早期凋亡细胞,随着处理时间的延长细胞凋亡率逐渐上升(P<0.01)。结论鱼藤酮选择性作用于多巴胺能神经元,使细胞内泛素化-αsynuclein发生聚集,而且这种变化具有时间依赖性,最终导致细胞发生凋亡,然而鱼藤酮对非多巴胺能神经元作用不明显。同时,鱼藤酮诱导泛素化-αsynuclein发生聚集的作用与神经元的特性存在密切关系。

【关键词】 鱼藤酮帕金森病-αsynuclein神经元损伤
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30570627)
  • 【分类号】R742.5
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】284
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