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大鼠P2特异性T淋巴细胞的培养及其NGF表达水平检测

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【作者】 陈建梅崔晓萍陈菁王建民许川李兵仓

【Author】 CHEN Jian-mei1,CUI Xiao-ping2,CHEN Jing1,WANG Jian-min1,XU Chuan1,LI Bing-cang1(1. 6th Laboratory of Field Surgery Research Institute,Daping Hospital,the Third Military Medical University,Chongqing 400042;2.Department of Neurology,Fuzhou General Hospital, Fujian Fuzhou 350025,China)

【机构】 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室南京军区福州总医院神经内科第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室 重庆400042福建福州350025重庆400042

【摘要】 目的培养针对Wistar大鼠周围神经自身抗原髓鞘碱性蛋白Ⅱ(myelin basic proteinⅡ,P2)特异性T淋巴细胞,用于研究其在神经再生中的作用。方法从成年Wistar大鼠周围神经内提取P2并配制成50%(质量浓度)匀浆,将其与完全福(氏)佐剂(CFA)按1∶1混匀后,按体重0.4mL/500g注入大鼠双后足垫内诱导实验性自身免疫性神经炎(EAN)模型。从EAN发病大鼠腹股沟淋巴结内分离T淋巴细胞,经4个循环的P2刺激后利用3H-TdR掺入法测定其对P2刺激的反应,采用流式细胞仪鉴定其表型,Western blot法检测其表达神经营养因子(NGF)水平。结果从大鼠周围神经内分离出一相对分子质量约为15000、等电点(PI)为9.5的蛋白,其相对分子质量和PI与文献一致,该蛋白即为P2。利用P2与CFA可诱导Wistar大鼠EAN动物模型,分离的T淋巴细胞对P2抗原呈特异性增殖,(95.72±0.85)%的细胞为CD4+T淋巴细胞,其NGF水平明显高于对照组(P<0.05)。结论利用提取的P2可诱导EAN并建立特异性T淋巴细胞,该T淋巴细胞具有较强的NGF表达能力,适用于神经再生研究。

【基金】 国家自然科学基金资助项目(30400454);国家重点基础研究发展规划专项经费资助项目(“973”项目,2005CB522604)
【所属期刊栏目】 论著 (2008年03期)
  • 【分类号】R741
  • 【被引频次】1
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