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人脐血间充质干细胞移植对创伤性脑损伤大鼠VEGF分泌及血管新生的影响

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【作者】 赵俊暕陈乃耀石峻王沂孟爱国韩晓燕赵辉

【Author】 ZHAO Jun-jian,CHEN Nai-yao,SHI Jun,WANG Yi,MENG Ai-guo,HAN Xiao-yan,ZHAO Hui.The Affiliated Hospital,Hebei united University,Tanshan Heibei,063000,China

【机构】 河北联合大学附属医院检验科天津商业大学天津市食品与生物技术重点实验室

【摘要】 目的探讨人脐血间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠创伤性脑损伤(TBI)模型的脑保护作用机制。方法大鼠随机分为假手术组、损伤对照组(对照组)和实验组,每组30只。对实验组和对照组采用改良Feeney自由落体方法制作大鼠TBI模型。假手术组只开骨窗,不撞击硬脑膜。造模操作后24h,实验组所有大鼠均经鼠尾静脉注入用Brdu标记的3×106个/mL MSCs(以1mL PBS液溶解)1mL;对照组和假手术组所有大鼠经鼠尾静脉注入等体积的PBS液。3组大鼠均未使用免疫抑制剂。以神经损伤严重缺损评分(NSS)方法评价各组大鼠神经损伤程度;各组大鼠注射后第3、7、14、21、28天,采用HE染色观察脑损伤周边区组织形态学变化,免疫组化方法观察损伤周边区Brdu阳性的MSCs分布、微血管密度及VEGF、VEGF-R2表达,原位杂交方法观察VEGF mRNA表达,并进行比较。结果实验组大鼠均未发现免疫排斥反应。注射后第7、14、21、28天实验组大鼠NSS评分均低于对照组(P<0.05)。光镜下假手术组大鼠脑组织细胞结构基本正常;对照组大鼠脑组织结构破坏,损伤区可见大量坏死细胞,胞核皱缩,细胞结构消失。实验组脑组织坏死范围缩小,细胞结构较对照组完整,核固缩较对照组明显减轻。Brdu阳性的MSCs在实验组大鼠脑损伤周边区明显聚集,4周后仍可见存活MSCs。实验组大鼠脑损伤周边区有较多单个血管内皮细胞和条索状的血管样结构,各时间点实验组MVD值均高于对照组(P<0.01);注射后各时间点实验组在损伤周边区表达细胞因子VEGF、VEGF-R2和VEGFmRNA的细胞计数均较对照组明显增多(P<0.05)。对照组和实验组因子VEGF、VEGF-R2和VEGFmRNA表达水平均分别在注射后第7、3、3天达高峰,此后对照组表达逐渐减弱,实验组第21天、甚至28天因子表达仍维持较高水平。结论在未应用免疫抑制剂的情况下,经尾静脉注射的MSCs可迁移至免疫功能健全的大鼠脑创伤灶周边区,促进VEGF、VEGF-R2和VEGF mRNA表达及血管新生,利于神经功能修复。

【基金】 河北省2010年医学科学研究重点课题(河北省卫生厅20100131)
【所属期刊栏目】 论著 (2013年04期)
  • 【分类号】R651.1
  • 【被引频次】13
  • 【下载频次】193
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