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重组猪源IFN-λ1植物乳杆菌的构建与表达验证

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【作者】 付婷婷马彬尧王茂鹏韩继成许汪陈竞姜宇航金宁一李昌

【Author】 FU Ting-ting;MA Bin-yao;WANG Mao-peng;HAN Ji-cheng;XU Wang;CHEN Jing;JIANG Yu-hang;JIN Ning-yi;LI Chang;College of Veterinary Medicine,Yangzhou University;Institute of Military Veterinary Medicine, Institute of Military Medical Sciences, Provincial Key Laboratory of Prevention and Control of Zoonosis;Wenzhou University Institute of Virology, Wenzhou University;

【通讯作者】 金宁一;李昌;

【机构】 扬州大学兽医学院军事医学研究院军事兽医研究所省部共建吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室温州大学病毒学研究所

【摘要】 为构建猪源3型干扰素(pIFN-λ1)的重组植物乳杆菌并进行验证。通过PCR方法扩增含有植物乳杆菌锚定信号肽的猪源IFN-λ1基因(pIFN-λ1),插入到pSIP411表达载体电转入到中间克隆宿主菌NZ3900中,获得重组质粒pSIP-pIFN-λ1;再次电转入到表达宿主植物乳杆菌Lp18获得重组植物乳杆菌;制备重组植物乳杆菌并验证其表达。结果显示,成功扩增出650 bp目的条带,电转入植物乳杆菌Lp18中成功构建重组Lp18:pSIP-pIFN-λ1。Western Blot、免疫荧光和流式细胞分析等方法验证重组蛋白pIFN-λ1的表达,获得阳性结果,阳性率为22.96%,且进一步证明其展示并锚定在植物乳杆菌表面。本试验成功构建了1株能稳定表达猪源IFN-λ1蛋白的重组植物乳杆菌,为猪源IFN-λ1的开发应用研究提供理论基础。

【关键词】 3型干扰素植物乳酸菌构建与表达
【基金】 国家重点研发计划(2017YFD0501002);国家自然科学基金(31802224)
【所属期刊栏目】 实验观察 (2019年04期)
  • 【分类号】Q78
  • 【下载频次】6
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