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实时荧光RPA快速检测犬冠状病毒方法的建立

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【作者】 熊炜蔡一村王楷宬张强黄保续田桢干林颖峥李健

【Author】 XIONG Wei;CAI Yi-cun;WANG Kai-cheng;ZHANG Qiang;HUANG Bao-xu;TIAN Zhen-gan;LIN Ying-zheng;LI Jian;Shanghai Inspection and Quarantine Technology Institute;China Animal Health and Epidemiology Center;

【通讯作者】 林颖峥;

【机构】 上海市检验检疫科学技术研究院中国动物卫生与流行病学中心

【摘要】 为提升口岸进出境犬猫科动物检疫工作效率,针对犬冠状病毒(CCV)基因保守序列,设计特异性引物和荧光探针,建立了CCV实时荧光重组聚合酶等温扩增方法(real-time RPA)。结果表明,该方法具有良好的特异性,与其他犬病毒和同属的冠状病毒均未出现交叉反应;其敏感性高于传统的RT-PCR方法;将该方法应用于CCV感染犬的临床组织样本、体表样本及不同时期和地区分离样本的检测,证实该实时荧光RPA方法具有良好的稳定性和可靠性。与现有的核酸检测方法相比,该实时荧光RPA检测方法在核酸上样20 min内即可判读结果,可满足犬猫科动物CCV快速检疫的需要。

【关键词】 犬冠状病毒实时荧光RPA方法
【基金】 国家重点研发计划“生物安全关键技术研发”专项(2017YFC1200500)
【所属期刊栏目】 实验观察 (2019年12期)
  • 【分类号】S852.655
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