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摘要:目的:研究Gefitinib对人胶质瘤U251细胞的生长抑制作用及相关机制。方法:用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度Gefitinib对U251细胞增殖活性的效应。流式细胞术(FCM)分析Gefitinib对U251细胞周期以及凋亡的影响,蛋白质印迹法检测周期、凋亡相关蛋白表达量的变化。罗丹明123/PI双染流式细胞术与吖啶橙(AO)染色荧光显微镜分析凋亡。结果:Gefitinib能显著抑制U251细胞的增殖,并呈剂量依赖关系,半数抑制浓度(IC50)为18.01μmol/L。通过流式、荧光染色以及蛋白质印迹检测分析发现,随着浓度的增加,Gefitinib能明显阻滞U251细胞于G0/G1期,主要通过降低线粒体膜电位诱导细胞凋亡,0、10、20和40μmol/L浓度处理后细胞凋亡率分别为1.28%、4.48%、77.97%和90.59%。Gefitinib对U251细胞的周期阻止与诱导凋亡主要是下调细胞周期依赖蛋白激酶CDK2、CDK4和CDK6的表达,同时上调p27Kip1的表达,引起细胞周期阻滞。上调、活化凋亡相关蛋白Bax,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,导致线粒体膜电位降低,活化Caspase-9,诱导细胞凋亡。结论:Gefitinib在15~60μmol/L浓度范围内,能明显抑制U251细胞的增殖并能通过周期阻滞诱导其凋亡,其作用呈浓度依赖关系。主要通过下调周期依赖蛋白激酶的表达阻滞U251细胞于G0/G1期,降低线粒体膜电位,活化Caspase途径诱导U251细胞凋亡。
  • DOI:

    10.16073/j.cnki.cjcpt.2013.01.007

  • 专辑:

    医药卫生

  • 专题:

    神经病学; 肿瘤学

  • 分类号:

    R739.41

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