记笔记

内耳注射药物建立新生鼠耳聋动物模型

胡凌翔^1,2吴皓^1,2石复辛^1,2

1. 上海交通大学耳科学研究所内耳发育与再生实验室 2. 上海交通大学医学院附属新华医院耳鼻咽喉头颈外科

摘要：目的通过纳升级微量注射泵内耳注射给药的实验方法,建立新生鼠耳聋动物模型。方法 42只出生第二天新生鼠,分别以注射速度分组:单纯穿刺组（对照组,6只,仅穿刺耳蜗底回侧壁,不注射液体）、蒸馏水1组（H2O 20组,4只,20nl/min）、蒸馏水2组（H2O 60组,3只,60nl/min）及药物浓度分组（新霉素各组给药速度为60nl/min）:新霉素1组（Neo1组,4只,1μmol/ml）、新霉素2组（Neo10组,4只,10μmol/ml）、新霉素3组Neo 50组,5只,50μmol/ml)、新霉素4组（Neo 100组,8只,100μmol/ml）及新霉素5组（Neo 50 1组,8只,50μmol/ml）。各组均采用耳蜗底回微创打孔技术,利用纳升级微量注射泵按上述各组用药、剂量及给药速度进行内耳药物注射。术后1天（Neo 50 1组）及3天（其余各组）采用基底膜免疫荧光染色观察内耳毛细胞及支持细胞的形态改变。结果术后新生鼠存活好,伤口恢复优良。耳蜗毛细胞机械性损伤与注射速度呈正相关,术后3天,H2O 20组和H2O 60组注射区域内、外毛细胞略减少,差异无统计学意义（P>0.05）。毛细胞损伤与新霉素浓度呈正相关,与对照组比较,术后3天Neo1组的外毛细胞数量及Neo10、50、100组内、外毛细胞数量均明显减少（P<0.05）。与H2O 60组比较,术后3天Neo50及Neo100组内、外毛细胞数量均明显减少（P<0.05）。新霉素50μmol/ml注射后1天（Neo 50 1组）与3天（Neo 50组）内、外毛细胞数量差异无统计学意义（P>0.05）。新霉素50μmol/ml注射后3天免疫荧光染色示支持细胞形态良好。结论利用纳升级微量注射泵给药方式注射50μmol/ml新霉素200纳升至内耳,可建立新生鼠耳聋动物模型,具有毛细胞死亡率高,致聋效果显著的优点;而支持细胞保留较好,且动物存活率高。

关键词：

内耳注射; 耳聋模型; 新霉素;

基金资助：

国家自然科学基金面上项目（81170924）；