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抗苗勒激素及生长分化因子-9对环磷酰胺体外降低大鼠卵巢储备力机制的研究

张凤英1夏天1赵丽颖2宋文嘉2李爽2

1. 天津中医药大学第一附属医院2. 天津中医药大学

摘要:目的研究抗苗勒激素(AMH)和生长分化因子-9(GDF-9)对环磷酰胺(Cy)降低卵巢储备力机制中的作用。方法成年雌性SD大鼠25只,取双侧卵巢组织,并切制成500μm厚的卵巢片,将卵巢片分为7组:空白组、Cy组、Cy+卵泡刺激素(FSH)组、Cy+AMH组、Cy+GDF-9组、Cy+FSH+AMH组、Cy+FSH+GDF-9组,放入含DMEM-F12培养液的培养皿中分别培养2 d或4 d。除空白组外,其余各组于培养液中分别添加Cy 100 ng/mL、FSH 10 mIU/mL、AMH 100ng/mL、GDF-9 100 ng/mL。利用双抗体夹心酶联免疫吸附技术(ELISA)检测雌二醇(E2)、抑制素B(INHB)的量;光镜下计数始基卵泡(PMF)及闭锁卵泡;运用DNA缺口原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果①与空白组相比,Cy组PMF数目明显降低,闭锁卵泡明显增多;Cy+AMH组及Cy+FSH+AMH组PMF数目明显多于除空白组之外的其他各组。各组培养4 d较培养2 d始基卵泡数目明显降低,闭锁卵泡数目明显增多。②与空白组相比,Cy组培养2 d和4 d时E2及INHB水平明显降低;与Cy组相比,培养2 d和4 d时Cy+FSH组、Cy+GDF-9组及Cy+FSH+GDF-9组E2、INHB明显升高。与Cy组相比,培养2 d和4 d时Cy+AMH组及Cy+FSH+AMH组E2明显升高。培养4 d时Cy+AMH组、Cy+FSH+AMH组INHB水平明显升高。③Cy组与空白组比较,凋亡细胞明显增多;Cy+FSH组、Cy+GDF-9组与Cy组相比,凋亡细胞的数量并没有显著减少。Cy+AMH组、Cy+FSH+AMH组与Cy组相比凋亡细胞的数量显著减少。结论Cy可加速PMF的募集与耗竭,从而使卵巢储备力降低乃至衰竭。FSH及GDF-9可加速PMF的募集与发育,使更多的PMF进入生长卵泡阶段而受到Cy细胞毒的损害,以致PMF库存逐渐耗竭;AMH可抑制PMF的募集与发育,从而减缓Cy对PMF的加速募集与耗竭,起到保护卵巢储备力的作用。
  • 专辑:

    医药卫生科技

  • 专题:

    肿瘤学

  • 分类号:

    R73-36

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