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摘要:【目的】确定FSH和雌激素联合作用是否可通过ERK1/2级联调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中Skp2的表达。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用Western blotting和实时荧光定量PCR检测Skp2蛋白、mRNA的表达。【结果】FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用时以时间依赖的方式促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30 min时到达高峰;FSH(50 ng.mL-1)、17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)和forskolin单独作用均促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对Skp2表达的影响与FSH或17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)单独作用无显著差异(P≥0.05),而环磷酸腺苷抑制剂(Rp-cAMP)、蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H-89)、L-Ca2+离子通道抑制剂(verapamil)和ERK1/2抑制剂(U0126)单独作用时对Skp2蛋白和mRNA的表达与空白对照相比无显著影响(P>0.05),但都抑制了FSH(50 ng.mL-1)与17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对Skp2蛋白和mRNA表达的影响(P<0.05)。H-89、verapamil单独作用对ERK1/2(细胞外信号调节的蛋白激酶1/2)活性没有影响,但降低了FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对ERK1/2活性的影响。【结论】FSH与17β-雌二醇联合作用激活了cAMP-PKA级联和Ca2+内流,而PKA和Ca2+内流又通过影响ERK1/2的活性进而影响Skp2的表达。
  • 专辑:

    农业科技

  • 专题:

    畜牧与动物医学

  • 分类号:

    S828

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