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DH10B菌株高效电转化条件探究

张洋王志强刘斌张晓军姜枫相建海

中国科学院海洋研究所北京华大基因组研究中心北京华大基因组研究中心 北京101300青岛266071中国科学院研究生院北京100039青岛266071北京华大基因组研究中心

摘要:以pUC19、pECBAC1、pCLD04541DNA以及3个不同大小的BACDNA为材料,研究了E.coli DH10B菌株在5个不同脉冲电场下的转化效率。研究发现,随着DNA片段大小的增加,最高转化效率和最适场强迅速减小。利用DH10B细胞转化pUC19 DNA的最适场强是21kV/cm,而190kb BAC DNA仅为13kV/cm;在最适场强下,40kb BAC DNA的转化效率约是190kb BAC DNA的50倍。通过大量数据绘制了不同因素影响下转化效率的变化曲线,优化了E.coli DH10B菌株电转化条件,为质粒的重组转化以及大片段基因组文库的构建奠定了基础。
  • DOI:

    10.13345/j.cjb.2007.02.032

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  • 专题:

  • 分类号:

    Q78

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