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DH10B菌株高效电转化条件探究

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【作者】 张洋王志强刘斌张晓军姜枫相建海

【Author】 ZHANG Yang~ 1,3,WANG Zhi-Qiang~2,LIU Bin~ 1,2,ZHANG Xiao-Jun~1,JIANG Feng~2 and XIANG Jian-Hai~ 1* 1 Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China 2 Beijing Genomics Institute,Beijing 101300,China 3 Graduate School of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100039,China

【机构】 中国科学院海洋研究所北京华大基因组研究中心北京华大基因组研究中心 北京101300青岛266071中国科学院研究生院北京100039北京101300青岛266071北京华大基因组研究中心青岛266071

【摘要】 以pUC19、pECBAC1、pCLD04541DNA以及3个不同大小的BACDNA为材料,研究了E.coli DH10B菌株在5个不同脉冲电场下的转化效率。研究发现,随着DNA片段大小的增加,最高转化效率和最适场强迅速减小。利用DH10B细胞转化pUC19 DNA的最适场强是21kV/cm,而190kb BAC DNA仅为13kV/cm;在最适场强下,40kb BAC DNA的转化效率约是190kb BAC DNA的50倍。通过大量数据绘制了不同因素影响下转化效率的变化曲线,优化了E.coli DH10B菌株电转化条件,为质粒的重组转化以及大片段基因组文库的构建奠定了基础。

【基金】 国家自然科学基金资助(No.30230280,30200213);国家高技术研究与发展项目基金资助(No.2005AA626014)~~
  • 【DOI】10.13345/j.cjb.2007.02.032
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】26
  • 【下载频次】672
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