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野生型及c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A基因重组真核表达载体的体外表达

吴勇刘学刚赵武徐家丽郭嘉诚李慧敏丁周志王亚明宋伟

  蚌埠医学院第一附属医院儿科    蚌埠医学院第一附属医院心胸外科    蚌埠医学院第一附属医院超声心动图室  

摘要:目的:探讨野生型和c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A(VEGFA)基因重组真核表达载体(p EGFP-VEGFA)体外表达有无差异。方法:用脂质体法将野生型和突变型p EGFP-VEGFA转染人胚胎肾细胞(HEK293T),采用荧光显微镜观察重组载体VEGFA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白的表达,以实时荧光定量PCR法检测VEGFA mRNA的表达。结果:在经转染的HEK293T细胞内观察到绿色荧光,转染后48 h突变型p EGFP-VEGFA转染组荧光强度低于野生型p EGFPVEGFA转染组。突变型p EGFP-VEGFA转染组VEGFA mRNA表达明显低于野生型p EGFP-VEGFA转染组(P<0.01)。结论:在HEK293T细胞中,初步表明VEGFA突变体导致VEGFA mRNA和蛋白的表达水平均下调,为进一步研究VEGFA c.454C>T突变体在先天性左心室流出道病变发生中的作用奠定了基础。
  • DOI:

    10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.02.003

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  • 分类号:

    R541.1

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