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表面标志物Cripto-1表达对食管癌干细胞生长的作用机制研究

宋爽徐琳琳

河南医学高等专科学校组胚教研室

摘要:目的:探讨表面标志物Cripto-1(CR-1)的表达对食管癌干细胞生长的作用机制。方法:自食管癌Eca109细胞中分选Eca109干细胞,提取正常食管上皮细胞HEEC和Eca109细胞、Eca109干细胞总蛋白,采用Western-blot法检测CR-1表达水平;构建CR-1基因沉默载体CNE2/CR-1-及过表达载体CNE1/CR-1+,利用脂质体转染法将CNE2/CR-1-和CNE1/CR-1+分别转染进Eca109干细胞中,并设对照组,采用RT-PCR法检测CR-1表达;MTT法检测对照组、CNE2/CR-1-组、CNE1/CR-1+组Eca109干细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组Eca109干细胞凋亡情况;Western-blot法检测各组细胞Akt、p-Akt蛋白表达情况。结果:Eca109细胞及Eca109干细胞中CR-1表达均明显高于HEEC(P<0.01)。RT-PCR结果显示,CNE2/CR-1-组CR-1表达水平明显低于对照组,CNE1/CR-1+组明显高于对照组(P<0.01)。MTT结果显示,CNE2/CR-1-组细胞增殖明显低于对照组,CNE1/CR-1+组明显高于对照组(P<0.01)。流式细胞仪检测显示,CNE2/CR-1-组细胞凋亡率明显高于对照组,CNE1/CR-1+组细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.01)。Western-blot结果显示,CNE2/CR-1-组p-Akt蛋白表达明显低于对照组,CNE1/CR-1+组p-Akt蛋白表达明显高于对照组(P<0.01);而Akt蛋白表达未出现明显变化(P>0.05)。结论:CR-1作为潜在的食管癌干细胞标记物,可能通过PI3K/Akt信号通路调控食管癌干细胞的增殖与凋亡。
  • DOI:

    10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2017.10.006

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  • 分类号:

    R735.1

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