表面标志物Cripto-1表达对食管癌干细胞生长的作用机制研究

摘要：目的:探讨表面标志物Cripto-1（CR-1）的表达对食管癌干细胞生长的作用机制。方法:自食管癌Eca109细胞中分选Eca109干细胞,提取正常食管上皮细胞HEEC和Eca109细胞、Eca109干细胞总蛋白,采用Western-blot法检测CR-1表达水平;构建CR-1基因沉默载体CNE2/CR-1^-及过表达载体CNE1/CR-1⁺,利用脂质体转染法将CNE2/CR-1^-和CNE1/CR-1⁺分别转染进Eca109干细胞中,并设对照组,采用RT-PCR法检测CR-1表达;MTT法检测对照组、CNE2/CR-1^-组、CNE1/CR-1⁺组Eca109干细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组Eca109干细胞凋亡情况;Western-blot法检测各组细胞Akt、p-Akt蛋白表达情况。结果:Eca109细胞及Eca109干细胞中CR-1表达均明显高于HEEC（P<0.01）。RT-PCR结果显示,CNE2/CR-1^-组CR-1表达水平明显低于对照组,CNE1/CR-1⁺组明显高于对照组（P<0.01）。MTT结果显示,CNE2/CR-1^-组细胞增殖明显低于对照组,CNE1/CR-1⁺组明显高于对照组（P<0.01）。流式细胞仪检测显示,CNE2/CR-1^-组细胞凋亡率明显高于对照组,CNE1/CR-1⁺组细胞凋亡率明显低于对照组（P<0.01）。Western-blot结果显示,CNE2/CR-1^-组p-Akt蛋白表达明显低于对照组,CNE1/CR-1⁺组p-Akt蛋白表达明显高于对照组（P<0.01）;而Akt蛋白表达未出现明显变化（P>0.05）。结论:CR-1作为潜在的食管癌干细胞标记物,可能通过PI3K/Akt信号通路调控食管癌干细胞的增殖与凋亡。

关键词：

食管肿瘤; 干细胞标志物; 增殖; 凋亡;