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REV7基因对人结肠癌细胞周期及凋亡的影响

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【作者】 孙昊彤马璐赵晓鹏李昕隋御徐方

【Author】 SUN Haotong;MA Lu;ZHAO Xiaopeng;LI Xin;SUI Yu;XU Fang;Ningxia Medical University,School of Basic Medical Sciences;Ningxia Medical University Fertility Maintain Key Laboratory of Ministry of Education;

【通讯作者】 徐方;

【机构】 宁夏医科大学基础医学院宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室

【摘要】 目的探讨下调REV7基因对人结肠癌细胞HCT116、SW620细胞周期及凋亡的影响。方法通过体外培养人结肠癌细胞株HCT116、SW620,用REV7基因的特异性si RNA片段转染细胞,运用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹技术检测转染后细胞系的REV7基因干扰效率。选择REV7低表达具有统计学意义的上述细胞系作为实验组细胞,同时将加入转染试剂的HCT116、SW620细胞作为空白对照组,转染阴性RNA oligo干扰片段的HCT116、SW620细胞作为阴性对照组。采用流式细胞术测定各组细胞的细胞凋亡情况。通过Western blot法检测各组细胞抑癌蛋白P53、细胞周期蛋白P21、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、细胞凋亡蛋白BAK、BCL-XL表达水平。结果实时荧光定量PCR结果显示,HCT116、SW620细胞中si REV7干扰效率均高于60%(P<0.01);Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡结果显示,实验组与阴性对照相比,REV7下调促进HCT116、SW620细胞凋亡(P<0.05);Western blot结果显示,低表达REV7可下调HCT116、SW620细胞抗凋亡蛋白BCL-XL、细胞周期蛋白P21蛋白表达水平(P<0.01),上调促凋亡蛋白BAK、肿瘤抑制蛋白P53、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4蛋白表达水平(P<0.01)。结论下调REV7可以阻滞结肠癌细胞HCT116、SW620细胞周期并促进细胞凋亡,其机制可能与下调REV7后,引起抑癌蛋白P53、蛋白细胞周期蛋白CDK4、P21及细胞凋亡蛋白的BAK、BCL-XL的表达变化有关。

【基金】 国家自然科学基金(31360251);国际交流合作项目(宁科技字[2016]25号);宁夏医科大学生殖与遗传优势学科群开放课题(XY201607)
【所属期刊栏目】 论著 (2018年04期)
  • 【DOI】10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2018.04.001
  • 【分类号】R735.35
  • 【下载频次】55
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