植物CRISPR/Cas9基因组编辑系统与突变分析

马兴亮刘耀光

亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室华南农业大学生命科学学院

摘要：基因组定点编辑技术通过可编码核酸酶切割基因组特定位点,进而诱导基因组定点突变。CRISPR/Cas9（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9）基因组编辑系统由Cas9核酸酶以及sg RNA（Single guide RNA）组成,与其他可编码核酸酶系统如锌指核酸酶（Zinc finger nucleases,ZFNs）和类转录激活因子效应物核酸酶（Transcription activator-like effector nucleases,TALENs）相比具有更简便的操作性和更高的基因组定点编辑效率。目前在植物中已有多例应用CRISPR/Cas9系统进行基因组编辑的报道。本文从Cas9基因与sg RNA表达载体的构建策略,获得基因组定点编辑突变体的转化方法、突变的效率和特征、突变的检测方法等方面进行了总结,最后对植物中利用CRISPR/Cas9系统进行基因组编辑存在的问题以及发展前景进行了讨论。

关键词：

植物; CRISPR/Cas9; 靶向突变; 基因型鉴定;

基金资助：

转基因植物研究与产业化专项（编号:2014ZX08010-001;2014ZX08009-002）资助~~；